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2022初級檢驗技士高頻考點:雙向擴散試驗

更新時間:2021-08-04 16:11:15 來源:網(wǎng)絡 瀏覽50收藏20

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2022初級檢驗技士高頻考點:雙向擴散試驗

雙向擴散試驗是讓抗原和抗體雙方都在瓊脂中各自向對方擴散,在比例恰當之處形成抗原抗體沉淀線,觀察這種沉淀線的位置、形狀以及對比關系,可對抗原或抗體進行定性分析。根據(jù)試驗形式也可分為試管法和平板法兩種。

(一)試管法

(二)平板法

是鑒定抗原抗體的最基本、最常見的方法之一。根據(jù)沉淀線的有無、形態(tài)和位置可作如下分析:

1.抗原或抗體的存在與否以及相對含量的估計 沉淀線的形成是根據(jù)抗原抗體兩者比例所致,沉淀線如果靠近抗原孔,則表示抗體含量較大;沉淀線如果靠近抗體孔,則表示抗原含量較大;不出現(xiàn)沉淀線則表明無對應的抗體或抗原或者抗原過量。

2.抗原或抗體相對分子量的分析 抗原或抗體在瓊脂內自由擴散,其速度受分子量的影響。分子量小者擴散快,反之則較慢。由于慢者擴散圈小,局部濃度則較大,形成的沉淀線彎向分子量大的一方;如果兩者分子量大致相等,則形成直線。

3.抗原性質的分析 兩種受檢抗原的性質可完全相同、部分相同或完全不同。三種情況在雙向擴散試驗中表現(xiàn)如下:兩條沉淀線互相吻合相連,表明抗體與兩個抗原中的相同表位結合而沉淀,兩個抗原相同;沉淀線呈部分相切,說明兩個抗原之間有部分相同;兩條沉淀線交叉而過,說明兩個抗原完全不同。

4.抗體效價的滴定 雙向擴散試驗是抗血清抗體效價滴定的常規(guī)方法。固定抗原的濃度,稀釋抗體;或者抗原和抗體雙方皆作不同的稀釋,經過自由擴散,形成沉淀線,以出現(xiàn)沉淀線最高的抗體稀釋度為該抗體的效價。

5.抗原或抗體純度鑒定 用混合抗原或抗體鑒定抗體或抗原,出現(xiàn)一條沉淀線說明待測抗原或抗體純,出現(xiàn)多條沉淀線說明不純。

雙向擴散試驗簡單易行,用途廣泛,但該技術靈敏度低,出現(xiàn)結果慢,不能精確定量,這些弱點在相當程度上限制了它的應用。

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