2022初級檢驗(yàn)技師臨床檢驗(yàn)基礎(chǔ)考點(diǎn)：血液細(xì)胞染色

2022初級檢驗(yàn)技師臨床檢驗(yàn)基礎(chǔ)考點(diǎn)：血液細(xì)胞染色

1.瑞氏染色法

瑞氏染色法是最經(jīng)典、最常用染色法，尤其對于細(xì)胞質(zhì)成分、中性顆粒等可獲得很好的染色效果，但對細(xì)胞核的著色能力略差。姬姆薩染液對細(xì)胞核、寄生蟲(如瘧原蟲等)著色較好，結(jié)構(gòu)更清晰，但對細(xì)胞質(zhì)成分的著色能力略差。采用瑞氏一姬姆薩復(fù)合染液可使細(xì)胞胞質(zhì)、顆粒、胞核等均獲得滿意的染色效果。

瑞氏染料的質(zhì)量規(guī)格用吸光度比值(rA)來評價(jià)，rA測定方法：取瑞氏染液15～25μl，加甲醇10ml稀釋，混勻，以甲醇為空白管，分別在波長650nm(美藍(lán)吸收峰波長)、525nm(伊紅吸收峰波長)測定吸光度(rA=A650/A525)。新配制染料rA接近2，隨美藍(lán)逐漸氧化為天青B(其吸收峰為650nm，吸光度約為美藍(lán)一半)，rA也下降，降到1.3±0.1時(shí)，染料即可使用。新鮮配制的染料偏堿，須在室溫或是37℃下貯存一定時(shí)間，待美藍(lán)逐漸變?yōu)樘烨郆，貯存時(shí)間愈久，染色效果愈好。在貯存過程中，必須加塞，以防甲醇揮發(fā)(如加甘油)和氧化成甲酸，所用甲醇須為AR級，若其中含過多丙酮，會使染色偏酸，白細(xì)胞著色不良。

2.吉姆薩染色法

吉姆薩染液由天青，伊紅組成。染色原理和結(jié)果與瑞特染色法基本相同。嗜酸性顆粒為堿性蛋白質(zhì)，與酸性染料伊紅結(jié)合，染粉紅色，稱為嗜酸性物質(zhì)，細(xì)胞核蛋白和淋巴細(xì)胞胞漿為酸性，與堿性染料美藍(lán)或天青結(jié)合，染紫藍(lán)色，稱為嗜堿性物質(zhì)，中性顆粒呈等電狀態(tài)與伊紅和美藍(lán)均可結(jié)合，染淡紫色，稱為中性物質(zhì)。

PH對細(xì)胞染色有一些影響。細(xì)胞里各種成分均不蛋白質(zhì)，因?yàn)榈鞍踪|(zhì)系兩性電解質(zhì)，帶電荷隨溶液PH而定，在偏酸性環(huán)境里下在電荷增多，易和伊紅結(jié)合，染色為偏紅，在偏三性環(huán)境里負(fù)電荷增多，易和美藍(lán)或天青結(jié)合，染色偏藍(lán)。所以細(xì)胞染色對氫離子濃度十分敏感，染色用正經(jīng)片一定清潔，要無酸堿污染。配制頊特液一定用優(yōu)質(zhì)甲醇，稀釋染色一定用緩沖液，沖洗一定用水應(yīng)近中性，不然可導(dǎo)致各種細(xì)胞染色反應(yīng)異常，以致于識別困難，甚至造成錯(cuò)誤的。

一般性操作技術(shù)血涂片制備、細(xì)胞染色、顯微檢查、血液病診斷、染色不良。

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