分析放射免疫常用的方法-2018年臨床檢驗(yàn)技士考試復(fù)習(xí)資料
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放射免疫分析法(radioimmunoassay RIA)應(yīng)用競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合的原理,應(yīng)作放射性同素標(biāo)記抗原(或抗體)與相應(yīng)抗體(或抗原)結(jié)合,通過(guò)測(cè)定抗原抗體結(jié)合物的放射活性判斷結(jié)果,本方法可進(jìn)行超微量分析,敏感性高,可用于測(cè)定抗原、抗體、抗原抗體復(fù)合物。本法常用的同位素有125Ⅰ和131Ⅰ。
放射免疫分析常用的有液相法和固相法兩種:
(1)液相法:將待檢標(biāo)本(例如含胰島素抗原)與定時(shí)的同位素標(biāo)記的胰島素(抗原)和定時(shí)的抗胰島素抗體混合,經(jīng)一定作用時(shí)間后,分離收集抗原抗體復(fù)合物及游離的抗原,測(cè)定這兩部分的放射活性,計(jì)算結(jié)合率。在反應(yīng)系統(tǒng)中,待檢標(biāo)本的胰島素抗原與同位素標(biāo)記的胰島素競(jìng)爭(zhēng)奪戰(zhàn) 性與胰島素抗體結(jié)合。非標(biāo)記的抗原越多,標(biāo)記抗原與抗體形成的復(fù)合物越少。非標(biāo)記抗原含量與標(biāo)記抗原抗體復(fù)合物的量呈一定的函數(shù)關(guān)系。預(yù)先用標(biāo)準(zhǔn)的非標(biāo)記抗原作成標(biāo)準(zhǔn)曲線后,即可查出待檢標(biāo)本中胰島素的含量
(2)固相法:將抗原或抗體吸附到固相載體表面,然后加待檢標(biāo)本,最后加標(biāo)記抗體。測(cè)定固相載體的放射活性,常用的固相載體有溴化氰(CNBr)海豹化的紙片或聚苯乙烯小管。
放射免疫分析法應(yīng)用范圍廣泛,包括多種激素(胰島素、生長(zhǎng)激素、甲狀腺素等)維生素、藥物、IgE等。
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