臨床執(zhí)業(yè)醫(yī)師醫(yī)學微生物學第一講：(2)

　　臨床執(zhí)業(yè)醫(yī)師醫(yī)學微生物學第一講：(2)

　　(八)細菌感染的檢查方法與防治原則

　　同學們應重點掌握：1.細菌學診斷(1)標本的采集原則(2)檢驗程序

　　2.血清學診斷：常用的血清學診斷方法

　　3.人工主動免疫和人工被動免疫(1)適應性(特異性免疫)的獲得方式(2)人工免疫的概念和常用的免疫制劑

　　1.細菌學診斷

　　(1)標本的采集原則：嚴格無菌操作，在抗生素使用之前采集，采樣后盡快冷藏送檢及做好標記。

　　(2)病原菌的檢測程序：依次是標本的采集，直接鏡檢，病原微生物分離培養(yǎng)，抗原檢測、分子生物學技術檢測微生物特異性DNA或RNA、免疫學試驗。

　　2.血清學診斷

　　(1)酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)、放射免疫試驗(RIA)及免疫熒光試驗(IF)

　　ELISA、RIA及IF均為用于檢測感染者血清中特異性抗體或抗原的方法，均為應用標記的抗原檢測血清中抗異性抗體，或應用標記的抗體檢測血清中特異性抗原。

　　(2)蛋白印跡試驗(Western blot，WB)

　　蛋白印跡試驗(WB)是在ELISA應用原理基礎上發(fā)展的一項新技術，用于檢測微生物的特異性蛋白抗原或患者相對應的蛋白抗體的實驗室診斷方法。若用此試驗檢測患者血清特異性抗體，可用已知微生物蛋白抗原捕捉患者血清中特異性抗體，再結(jié)合酶標記抗人抗體并觀察結(jié)果。

　　(3)中和試驗(NT)

　　中和試驗(NT)為在檢測病原微生物(病毒、細菌等)的血清學試驗過程中，先在被檢血清或其他液體標本中加人已知的特異性抗體或抗原，使其發(fā)生中和反應后，再檢測被檢血清中其特異性抗原或抗體。

　　(4)試管凝集試驗

　　肥達氏試驗是輔助診斷傷寒或副傷寒病常用的一種血清學試驗，即用已知傷寒沙門氏菌的菌體抗原(O抗原)、鞭毛抗原(H抗原)及甲型或乙型副傷寒桿菌的鞭毛抗原(PA或PB抗原)，測定人血清中相應抗體效價。

　　3.人工主動免疫和人工被動免疫

　　(1)適應性免疫(特異性免疫)的獲得方式：對某種感染性疾病的特異性免疫可由病后天然免疫和人工免疫獲得。人工免疫又分為人工主動免疫與人工被動免疫。

　　(2)人工免疫的概念

　?、偃斯ぶ鲃用庖撸菏怯萌斯そ臃N的方法給機體注射抗原性物質(zhì)(疫苗)，使機體免疫系統(tǒng)因受抗原刺激而產(chǎn)生體液和細胞免疫應答的過程。此種免疫應答出現(xiàn)較晚，維持時間較長，多用于疾病的預防。

　?、谌斯け粍用庖撸簽閷⒑刑禺愋钥贵w的免疫血清或免疫細胞因子等制劑，直接注入機體，使之立即獲得免疫力。此種免疫持續(xù)時間短。

　　(3)常用的免疫制劑

　　1)人工主動免疫制劑：

　?、贉p毒活菌(疫)苗：如卡介苗、布氏桿菌減毒活菌苗等。

　?、跍缁罹?疫)苗：如傷寒、百日咳及霍亂死疫苗等。

　?、垲惗舅兀簽榧毦舛舅亟?jīng)0.3%~0.4%甲醛液處理后，其毒性消失，但仍保留抗原性的生物制品。

　?、軄唵挝灰呙纾喝缒X膜炎球菌和肺炎球菌的莢膜多糖疫苗。

　?、莼蛑亟M疫苗或稱基因工程疫苗：將微生物特異性抗原表達基因，與工程菌(如酵母菌)充足并表達蛋白質(zhì)產(chǎn)物，經(jīng)純化制成疫苗。最成功的為乙型肝炎重組疫苗。

　?、?DNA疫苗：是將編碼病原表面某種具有保護性免疫作用的抗原基因插入酵母菌，使之表達目的基因。處于研究階段。

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