2012主管藥師輔導(dǎo):酶促反應(yīng)過程的分期及特點(diǎn)
1.延滯期$lesson$
在過量的底物存在下,底物與酶結(jié)合啟動(dòng)酶促反應(yīng)。由于各種因素的影響,酶促反應(yīng)的初始速率比較慢,經(jīng)過一段時(shí)間后,反應(yīng)速度加快并到達(dá)最大,這段時(shí)間稱為延滯期。一般來說,此期從幾秒至幾分鐘,通常為1~3min.
2.線性期
指酶促反應(yīng)速度達(dá)到并保持恒定速率進(jìn)行反應(yīng)的時(shí)期。此時(shí),反應(yīng)速率不受底物濃度的影響,該反應(yīng)階段稱為零級(jí)反應(yīng)期(zero order);由于底物消耗量或產(chǎn)物生成量與時(shí)間呈線性關(guān)系,而單位時(shí)間內(nèi)的變化速率恒定不變,故又稱線性反應(yīng)期(linear phase)。此期酶活性與反應(yīng)速率成正比,是酶活性測(cè)定的最佳時(shí)期,一般為l~5 min.
3.非線性期
隨著反應(yīng)時(shí)間的延長,底物消耗越來越明顯,酶促反應(yīng)速度明顯下降,偏離線性而進(jìn)入非線性期。此時(shí),反應(yīng)速率與底物【S】成正比,故稱為一級(jí)反應(yīng)期(first order)。如果反應(yīng)速率受兩種或兩種以上物質(zhì)濃度的影響,則反應(yīng)可為一級(jí)、二級(jí)或多級(jí)反應(yīng)。因產(chǎn)物【P】與時(shí)間t不成線性關(guān)系,又稱為非線性反應(yīng)期。此期,酶促反應(yīng)速率不再與酶活力成正比。
要準(zhǔn)確測(cè)定酶活性,必須了解不同酶反應(yīng)速率和時(shí)間的關(guān)系,找出酶促反應(yīng)速率恒定的時(shí)間,避開延滯期、非線性反應(yīng)期。傳統(tǒng)的手工分析法無法在零級(jí)反應(yīng)期測(cè)定,故結(jié)果不夠準(zhǔn)確。
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