初級檢驗技士輔導：白喉棒狀桿菌微生物學檢驗
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初級檢驗技士輔導：白喉棒狀桿菌微生物學檢驗 $lesson$
微生物學檢驗
(1)標本采集：從假膜邊緣采集分泌物，立即送檢。未見假膜的疑似患者或帶菌者可采用鼻咽部或扁桃體黏膜上的分泌物。若為培養(yǎng)，應在使用抗生素或其他抗菌藥物前采集雙份標本。如不能立即送檢，應將標本浸于無菌生理鹽水或15%甘油鹽水中保存。
(2)檢驗方法及鑒定：
1)直接鏡檢：標本革蘭和異染顆粒染色。鏡檢如發(fā)現(xiàn)G+，形狀為典型的棒狀桿菌，且有異染顆粒，可初步報告“直接涂片檢出形似白喉棒狀桿菌”，為臨床早期診斷提供依據(jù)。
2)分離培養(yǎng)：將另一份標本接種于下列培養(yǎng)基中。
①呂氏血清斜面：本菌在此培養(yǎng)基上生長較標本中雜菌迅速，于35℃培養(yǎng)8-12h后，即形成灰白色的菌落，而其他雜菌尚未形成菌落。本菌在甘油血清斜面上形成的異染顆粒更為明顯;
�、趤嗧谒嵫傊桨澹簩吮窘臃N于亞碲酸血瓊脂平板，37℃培養(yǎng)18-24h，觀察菌落特點。在此培養(yǎng)基上，大部分雜菌被抑制，白喉桿菌則生長緩慢，呈現(xiàn)1mm、黑色或灰黑色特點的典型菌落。
若在呂氏血清斜面和亞碲酸血瓊脂平板上，同時發(fā)現(xiàn)菌落和菌體形態(tài)很典型的棒狀桿菌，即可準確報告為陽性。
若在亞碲酸血瓊脂平板上菌落典型，而在呂氏血清斜面陰性，也可報告為陽性。
若在呂氏血清斜面菌落及菌體形態(tài)典型，而在亞碲酸血瓊脂平板上無典型菌落生長，可暫報為可疑，并將呂氏血清斜面的培養(yǎng)物轉(zhuǎn)種于亞碲酸血瓊脂平板，等待生長出典型菌落。
若兩者均為陰性，必須觀察 72小時后方可作出報告。
(3)生化反應：主要用于鑒別白喉棒狀桿菌與類白喉棒狀桿菌。
(4)毒力試驗：可作為鑒定致病菌株的重要依據(jù)。試驗方法分體外和體內(nèi)兩大類。體外法有雙向瓊脂擴散法、SPA協(xié)同凝集試驗、對流免疫電泳;體內(nèi)法可用豚鼠做毒素中和試驗。