初級中藥士輔導：中成藥分離與精制(4)

　　初級中藥士輔導：中成藥分離與精制(4) $lesson$

　　色譜分離法

　　1、吸附色譜法

　　原理：利用同一吸附劑對混合物中各種成分吸附能力的差異，而使各成分達到分離目的的色譜方法。吸附劑、溶質及溶劑為固液吸附的三要素。此法特別適用于脂溶性中等分子量成分的分離。

　　常用吸附劑：硅膠、氧化鋁

　　2、凝膠過濾色譜法(排組色譜、分子篩色譜)

　　常用的有葡聚糖凝膠(sephadex G),聚丙烯酰胺凝膠(Bio-GelP)，及羥丙基葡聚糖凝膠(Sepharese LH-20)等。主要用于分子量1000以下的化合物的分離。葡聚糖凝膠只適于在水中應用。羥丙基葡聚糖凝膠適于在不同類型的有機溶劑中應用。

　　分離原理

　　葡聚糖凝膠吸水后，形成凝膠粒子，在交鏈鍵的骨架中存在著許多網眼，網眼大可使大分子量的化合物進入，網眼小則只能使小分子量的化合物進入。超過一定限度的大分子物質，就被排阻在凝膠顆粒的外部難以進入網眼內部，則大分子物質首先被洗出。

　　3、離子交換色譜法

　　適于具有酸、堿或兩性的化合物，可離子化物質的分離。如：氨基酸、生物堿、有機酸和酚類。

　　離子交換色譜取決于化合物解離度的大小，帶電荷的多少。解離度小的化合物先被洗脫。離子交換劑有離子交換樹脂、離子交換纖維素和離子交換凝膠三種。

　　4、大孔吸附樹脂法

　　原理

　　即具有吸附性，又具有篩選性分離的特點。吸附性是由于范德華引力或氫鍵吸附的結果;篩選性則由多孔性網狀結構引起的。一般來說，大孔樹脂的色譜行為具有反相的性質。被分離物質的極性越大，其Rf值越大。對洗脫劑而言，極性越大的溶劑，洗脫能力越弱。大孔吸附樹脂在水中的吸附性強。

　　洗脫液的選擇

　　常用甲醇，乙醇，丙酮，乙酸乙酯等。

　　先用適量水洗下蛋白質、鞣質、低聚糖、多糖等極性物質。再用低到高濃度的醇依次洗脫，一般70%乙醇洗脫皂苷;3%～5%堿液洗下黃酮、有機酸、酚類和氨基酸。10%酸洗下生物堿、氨基酸。丙酮洗下中性親脂性成分。

　　優(yōu)點：吸附容量大，選擇性好，成本低，收率較高，吸附速度快，再生容易等優(yōu)點。

　　5、分配色譜

　　正相色譜：固定相的極性大于流動相;分離水溶性和極性較大的化合物

　　反相色譜：固定相的極性小于流動相;分離脂溶性化合物

　　常用的反相鍵合柱親脂性：RP-18>RP-8>RP-2 常用流動相 甲醇-水或乙腈-水。

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