初級檢驗技士輔導：霍亂弧菌的檢驗方法

　　初級檢驗技士輔導：霍亂弧菌的檢驗方法 $lesson$

　　檢驗方法及鑒定

　　1)直接鏡檢：

　　動力觀察：采取病人“米泔水樣”大便或嘔吐物制成懸滴片，觀察細菌動力，可見流星或穿梭狀動力的細菌。

　　制動試驗：取病人“米泔水樣”大便標本或6小時蛋白胨水增菌液中發(fā)現(xiàn)運動活潑的弧菌，可再做一張涂片，加一滴不含防腐劑的霍亂多價診斷血清(效價1：64)，用暗視野鏡觀察，3分鐘內最初活潑的弧菌被凝集，運動被抑制，即為陽性，則可鑒定。

　　涂片染色：取標本涂片2張，干燥后用乙醇固定，分別用革蘭染色及1：10稀釋復紅染色，鏡檢有無革蘭氏陰性，并成魚群狀排列的弧菌。

　　2)細菌分離培養(yǎng)

　?、僦苯臃蛛x培養(yǎng)：急性期患者米泔水樣糞便標本，除增菌外可同時將標本分離培養(yǎng)，?？色@得陽性結果。分離用的培養(yǎng)基有強、弱2種選擇培養(yǎng)基。弱選擇培養(yǎng)基如堿性瓊脂和堿性膽鹽瓊脂，抑制能力弱，糞便中某些雜菌仍可生長。強選擇性培養(yǎng)基常用的有慶大霉素瓊脂等?，F(xiàn)多采用堿性蛋白胨水增菌，再用強選擇培養(yǎng)基進行分離。

　　②增菌后分離培養(yǎng)：來自帶菌者或恢復期患者的標本，因含菌量少必須先增菌后分離?？蓪吮窘臃N于堿性蛋白胨水內，置35℃增菌6-8小時后分離培養(yǎng)，必要時可做二次增菌后再進行分離培養(yǎng)。

　　3)鑒定：

　　根據(jù)霍亂弧菌在各種選擇培養(yǎng)基上的特點，挑選可疑菌落進行鑒定。鑒定以血清學(玻片凝集)為主，結合形態(tài)學、生化反應作出判斷。必要時作其他試驗以便與其他細菌進行鑒別。

　?、俨Ｆ囼灒簭姆蛛x培養(yǎng)基上挑取可疑菌落于霍亂弧菌多價診斷血清(效價1:32-1:64)作玻片凝集試驗。立即出現(xiàn)凝集者為陽性，同時設生理鹽水和陽性細菌株對照。

　?、谛螒B(tài)學檢查：取純培養(yǎng)物涂片革蘭氏染色，觀察菌體形態(tài)及染色性。用懸滴法或半固體穿刺法檢測動力。

　?、凵磻夯魜y弧菌氧化酶試驗、吲哚試驗、粘絲試驗和霍亂紅試驗均陽性。

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