初級檢驗技士輔導:埃希菌屬微生物學檢查
初級檢驗技士輔導:埃希菌屬微生物學檢查 $lesson$
微生物學檢查
1、標本采集:
腸道感染可采集糞便;腸外感染可根據臨床感染情況采集標本,除血液標本外,均需作涂片染色檢查。膿、痰、分泌物可直接涂片,革蘭染色后鏡檢。尿液和其它液體先低速離心,再取沉淀物作涂片。
2、檢驗方法及鑒定
(1)涂片與鏡檢:膿汁及增菌培養(yǎng)物發(fā)現單一革蘭陰性桿菌,可初步報告,染色、形態(tài)、性狀供臨床用藥參考。
(2)分離培養(yǎng):糞便標本可用弱選擇鑒別培養(yǎng)基進行分離,膿汁等可用血平板分離,取可疑菌落進行形態(tài)觀察及生化反應。
(3)鑒定:
1)初步鑒定:根據菌落特征,涂片染色的菌形及染色反應,取純培養(yǎng)物作生化反應。
凡符合KIA(克氏雙糖):A/A或K/A(A是產酸,K是產堿),產氣或不產氣,H2S(陰性),尿素(MIU):動力+或-、吲哚+、脲酶-,甲基紅+,硝酸鹽還原+,VP-,氧化酶-,枸櫞酸鹽-,可鑒定為大腸埃細菌。
2)最后鑒定:一般常規(guī)檢驗做到上述初步鑒定即可,必要時可做系列生化反應最后鑒定。其中主要的鑒定試驗為:氧化酶陰性、發(fā)酵葡萄糖產酸產氣或只產酸、發(fā)酵乳糖產酸產氣或遲緩發(fā)酵產酸、不發(fā)酵肌醇、IMViC反應為++--、脲酶陰性、H2S陰性、苯丙氨酸脫氫酶陰性、硝酸鹽還原陽性、動力多數陽性。
3)某些大腸埃細菌,尤其是無動力的不發(fā)酵乳糖株,應與志賀菌相鑒別,兩者的主要鑒別試驗可用醋酸鈉和葡萄糖銨利用試驗及粘質酸鹽產酸三種試驗。大腸埃希菌均為陽性,而志賀菌均為陰性。
腸道外感染,經涂片染色,分離培養(yǎng)后,生化鑒定到種;由于大腸埃希菌是超廣譜β-內酰胺酶的主要產酶株,該酶由質粒介導。應對β-內酰胺酶產菌株進行確定,根據藥敏試驗結果選用有活性的抗生素進行治療。
4)血清學鑒定:
ETEC(腸毒素型大腸桿菌)血清學鑒定
EPEC(腸致病型大腸桿菌)血清學鑒定
EIEC(腸侵襲型大腸桿菌)血清學鑒定
EHEC(腸出血型大腸桿菌)血清學鑒定
EAEC(腸凝聚型大腸桿菌)血清學鑒定
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