初級(jí)檢驗(yàn)技師輔導(dǎo):熒光免疫組織化學(xué)技術(shù)
更新時(shí)間:2010-12-10 11:25:28
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初級(jí)檢驗(yàn)技師輔導(dǎo):熒光免疫組織化學(xué)技術(shù)
熒光免疫組織化學(xué)技術(shù)
(1)直接法
①檢查抗原法:用已知特異性抗體與熒光素結(jié)合,制成熒光特異性抗體,直接與細(xì)胞或組織中相應(yīng)抗原結(jié)合,在熒光顯微鏡下即可見抗原存在部位呈現(xiàn)特異性熒光。此法特異、簡(jiǎn)便,但一種熒光抗體只能檢查一種抗原,敏感性較差。
?、跈z查抗體法:將抗原標(biāo)記上熒光素,即為熒光抗原,用此熒光抗原與細(xì)胞或組織內(nèi)相應(yīng)抗體反應(yīng),而將抗體定位檢測(cè)出來。
(2)間接法:①夾心法;②檢查抗體法;此法是檢驗(yàn)血清中自身抗體和多種病原體抗體的重要手段。③檢查抗原法雙薄片。
(3)補(bǔ)體法:①直接檢查組織內(nèi)免疫復(fù)合物法。②間接檢查組織內(nèi)抗原法。
(4)雙標(biāo)記熒光免疫法:將兩種熒光抗體(如抗A和抗B)以適當(dāng)比例混合,加在標(biāo)本上孵育后,按直接法洗去未結(jié)合的熒光抗體,抗A抗體用異硫氰酸熒光素標(biāo)記,發(fā)黃綠色熒光;抗B抗體用TMRITC或RB200標(biāo)記,發(fā)紅色熒光,可以明確顯示兩種抗原的定位。
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