初級檢驗技士:腦膜炎奈瑟菌微生物學(xué)檢驗
初級檢驗技士:腦膜炎奈瑟菌微生物學(xué)檢驗
微生物學(xué)檢驗
(1)標(biāo)本采集:菌血癥期時采血液;出現(xiàn)出血點或瘀斑者采取瘀斑滲出液;出現(xiàn)腦膜刺激癥時可抽腦脊液;上呼吸道感染期的和帶菌者可取鼻咽分泌物。
注意:該菌能產(chǎn)生自溶酶,易自溶,故采集時標(biāo)本不宜放冰箱,應(yīng)保溫立即送檢。必要時可作雙份血清測定抗體效價的變化。
(2)檢驗方法及鑒定:
1)直接涂片檢查:
?、兖鲅撸捍唐起霭哐∑?,或血膜片,干燥固定后革蘭染色陰性雙球菌,呈腎形成對排列,可初診。
?、谀X脊液:取腦脊液離心后沉淀物涂片,干燥固定后革蘭染色,若發(fā)現(xiàn)中性粒細(xì)胞內(nèi)或胞外革蘭陰性雙球菌,呈腎形成對排列,結(jié)合臨床可確診。
2)分離培養(yǎng):將標(biāo)本葡萄糖肉湯增菌培養(yǎng)液,直接接終于血瓊脂平板、巧克力瓊脂平板,置于5%-10%CO2環(huán)境中,35℃培養(yǎng)18-24小時后可見圓形、灰褐色、濕潤、光滑、邊緣整齊、直徑1-2mm的小菌落,經(jīng)涂片證實為革蘭陰性雙球菌,并進(jìn)一步根據(jù)相應(yīng)的生化反應(yīng)等試驗予以鑒定。
3)鑒定:該菌鑒定主要通過氧化酶、糖類發(fā)酵和血清學(xué)等試驗以及培養(yǎng)生長特點進(jìn)行。
①細(xì)菌染色形態(tài);
?、谘趸冈囼炾栃?
?、塾|酶試驗陽性;
④分解葡萄糖、麥芽糖產(chǎn)酸不產(chǎn)氣;
⑤莢膜多糖抗原直接凝集試驗。
(3)結(jié)果評價和報告
重視腦脊液和瘀點穿刺物的直接鏡檢,這是最快速確證腦膜炎奈瑟菌的簡便方法。
直接鏡檢為革蘭染色陰性雙球菌,可初報,經(jīng)分離培養(yǎng)后見菌落特征典型、生化反應(yīng)能力弱,只分解葡萄糖、麥芽糖、產(chǎn)生少量酸,氧化酶試驗陽性,可報“檢出腦膜炎耐瑟菌”??焖偃槟z凝集試驗陽性。
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