初級檢驗技師考試輔導：抗血清的制備

　　初級檢驗技師考試輔導：抗血清的制備

　　抗血清的制備

　　(1)免疫動物的選擇：

　?、倏乖c免疫動物的種屬差異越遠越好。

　　②動物必須適齡、健壯、無感染、體重合乎要求。

　?、坩槍Σ煌再|(zhì)的免疫原，選用相應的動物。甾類激素多用家兔;酶類多用豚鼠。

　?、芸寡逡鬄镽(rabbit)型或H(horse)型血清。

　　此外需要制備大量免疫血清時，應選用馬、綿羊等大動物;若需要量不多，則選用家兔、豚鼠和雞等。

　　(2)免疫方法及途徑

　?、倜庖咴淖⑸鋭┝浚簯紤]抗原性強弱、分子量大小、動物的個體狀態(tài)和免疫時間。

　　②免疫途徑：通常有靜脈、腹腔、肌肉、皮內(nèi)、皮下、淋巴結(jié)及足掌等。

　?、勖庖叻桨福焊鶕?jù)設(shè)計的目的要求、抗原性質(zhì)、佐劑的種類來制定免疫方案。可采用全量免疫法、微量免疫法或混合免疫法。

　?、芸贵w產(chǎn)生階段：可分靜止期(約2天，血中尚無抗體);指數(shù)期(約4天左右，抗體迅速上升);穩(wěn)定期(約2～4周，抗體保持一個穩(wěn)定水平);下降期(約幾個月后，此時抗體緩慢下降)四個階段。

　　(3)抗血清的鑒定和保存

　　1)特異性抗體的鑒定：

　?、倏贵w特異性鑒定：常采用雙向免疫擴散法。

　?、诳贵w的效價的鑒定：常采用雙向免疫擴散法。一是僅稀釋抗血清，與同一濃度抗原反應;另一是抗血清、抗原同時稀釋作棋盤滴定。

　　③抗體的純度鑒定：常用SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳法鑒定。

　　2)抗血清的保存：

　?、偈?℃保存，通?？杀４?個月～半年，效價高時可保存一年左右;

　?、谑?20℃～-40℃低溫保存，可保存5年左右，但需防止反復凍融;

　　③種是真空冰凍干燥保存，可保存5～10年。

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