臨床執(zhí)業(yè)醫(yī)師[生物化學(xué)]考點(diǎn):核酸的理化性質(zhì)
更新時(shí)間:2010-08-24 13:15:53
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核酸的理化性質(zhì)
1、DNA的變性
在某些理化因素作用下,如加熱,DNA分子互補(bǔ)堿基對(duì)之間的氫鍵斷裂,使DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)松散,變成單鏈,即為變性。監(jiān)測(cè)是否發(fā)生變性的一個(gè)最常用的指標(biāo)是DNA在紫外區(qū)260nm波長(zhǎng)處的吸光值變化。解鏈過(guò)程中,吸光值增加,并與解鏈程度有一定的比例關(guān)系,稱(chēng)為DNA的增色效應(yīng)。紫外光吸收值達(dá)到最大值的50%時(shí)的溫度稱(chēng)為DNA的解鏈溫度(Tm),一種DNA分子的Tm值大小與其所含堿基中的G+C比例相關(guān),G+C比例越高,Tm值越高。
2、DNA的復(fù)性和雜交
變性DNA在適當(dāng)條件下,兩條互補(bǔ)鏈可重新恢復(fù)天然的雙螺旋構(gòu)象,這一現(xiàn)象稱(chēng)為復(fù)性,其過(guò)程為退火,產(chǎn)生減色效應(yīng)。不同來(lái)源的核酸變性后,合并一起復(fù)性,只要這些核苷酸序列可以形成堿基互補(bǔ)配對(duì),就會(huì)形成雜化雙鏈,這一過(guò)程為雜交。雜交可發(fā)生于DNA-DNA之間,RNA-RNA之間以及RNA-DNA之間。
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