2018年臨床執(zhí)業(yè)醫(yī)師考試重要考點(diǎn)：蛋白質(zhì)沉淀方法

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2018年臨床執(zhí)業(yè)醫(yī)師考試重要考點(diǎn)：蛋白質(zhì)沉淀方法

1.鹽析：在蛋白質(zhì)溶液中若加大量中性鹽，蛋白質(zhì)膠粒的水化層即被破壞，其所帶電荷也被中和，蛋白質(zhì)膠粒因失去這兩種穩(wěn)定因素而沉淀。此種沉淀過(guò)程稱為鹽析。常用的中性鹽有硫酸銨、硫酸鈉和氯化鈉等。鹽析沉淀的蛋白質(zhì)不發(fā)生變性是其優(yōu)點(diǎn)，缺點(diǎn)是沉淀的蛋白質(zhì)中混有大量中性鹽，必須經(jīng)透析除去。

2.重金屬鹽沉淀蛋白質(zhì)：重金屬離子如Ag十、Hg2+、Cu2十、Pb2十等，可與蛋白質(zhì)的負(fù)離子結(jié)合，形成不溶性蛋白質(zhì)沉淀。沉淀的條件為pH稍大于蛋白質(zhì)的pI為宜。

3.生物堿試劑與某些酸沉淀蛋白質(zhì)：生物堿試劑如苦味酸、鞣酸、鎢酸等以及某些酸，如三氯醋酸、磺酸水楊酸、硝酸等，可與蛋白質(zhì)的正離子結(jié)合成不溶性的鹽沉淀。沉淀的條件是pH﹤PI. 4)有機(jī)溶劑沉淀蛋白質(zhì)：可與水混合的有機(jī)溶劑，如酒精、甲醇、丙酮等能與蛋白質(zhì)爭(zhēng)水，破壞蛋白質(zhì)膠粒的水化膜，使蛋白質(zhì)沉淀析出。在常溫下，有機(jī)溶劑沉淀蛋白質(zhì)往往引起變性。

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