2020年口腔執(zhí)業(yè)醫(yī)師備考資料（口腔念珠菌病的診斷方法）

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1.涂片法：只能發(fā)現(xiàn)真菌而不能確定菌種，對(duì)于口腔黏膜干燥的患者陽性率也較低。

(1)直接涂片：取口腔黏膜區(qū)假膜、脫落上皮等標(biāo)本，涂一薄層于載玻片上，滴入10%KOH溶液，微加熱以溶解角質(zhì)。光鏡觀察，可見折光性強(qiáng)的芽生孢子和假菌絲，從而在數(shù)分鐘內(nèi)提供念珠菌感染的證據(jù)。

(2)革蘭染色：用棉簽或竹片刮取損害組織后趁濕潤時(shí)固定，常規(guī)革三染色呈陽性。

(3)PAS染色：標(biāo)本干燥后用PAS染色，芽胞呈紅色，假菌絲較藍(lán)，較便于觀察。

2.培養(yǎng)法：將標(biāo)本接種于沙氏培養(yǎng)基，經(jīng)3～4日后，形成乳白色圓形突起的菌落。若接種在玉米瓊脂培養(yǎng)基上，則菌落發(fā)育更旺盛，中心隆起。鏡檢若查見厚壁孢子，可確診為白色念珠菌。

(1)棉拭子法：用棉拭子在病損區(qū)取材。

(2)唾液培養(yǎng)法：收集非刺激性唾液1～2ml接種。

(3)含漱液濃縮法：取1ml滅菌磷酸鹽緩沖液充分含漱l分鐘，離心后棄上清，取1ml 接種。

(4)紙片法：應(yīng)用選擇性培養(yǎng)基與化學(xué)指示劑吸附于混合纖維素酯微孔濾膜印制的圓片，取刮片標(biāo)本接種其上，37℃培養(yǎng)24小時(shí)，可出現(xiàn)棕黑色菌落。

3.免疫法：用間接免疫熒光法測(cè)定血清和非刺激性混合唾液的抗念珠菌熒光抗體。因存在較強(qiáng)的免疫交叉反應(yīng)性，故假陽性率(誤檢率)較高。

4.活檢法：對(duì)于慢性或肥厚性損害可進(jìn)行活檢，將組織切片用PAS染色，鏡下可見增生的口腔黏膜上皮細(xì)胞間有芽生孢子和菌絲。

5.基因診斷：近年來，分子水平的研究使得對(duì)念珠菌的認(rèn)識(shí)突破表型鑒定的局限，應(yīng)用基因分型方法對(duì)念珠菌進(jìn)行種間鑒別和種內(nèi)分型，為臨床診斷和流行病學(xué)研究提供了更能反映物種本質(zhì)的工具。

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