2012主管藥師輔導(dǎo):酶促反應(yīng)過程的分期及特點
1.延滯期$lesson$
在過量的底物存在下,底物與酶結(jié)合啟動酶促反應(yīng)。由于各種因素的影響,酶促反應(yīng)的初始速率比較慢,經(jīng)過一段時間后,反應(yīng)速度加快并到達最大,這段時間稱為延滯期。一般來說,此期從幾秒至幾分鐘,通常為1~3min.
2.線性期
指酶促反應(yīng)速度達到并保持恒定速率進行反應(yīng)的時期。此時,反應(yīng)速率不受底物濃度的影響,該反應(yīng)階段稱為零級反應(yīng)期(zero order);由于底物消耗量或產(chǎn)物生成量與時間呈線性關(guān)系,而單位時間內(nèi)的變化速率恒定不變,故又稱線性反應(yīng)期(linear phase)。此期酶活性與反應(yīng)速率成正比,是酶活性測定的最佳時期,一般為l~5 min.
3.非線性期
隨著反應(yīng)時間的延長,底物消耗越來越明顯,酶促反應(yīng)速度明顯下降,偏離線性而進入非線性期。此時,反應(yīng)速率與底物【S】成正比,故稱為一級反應(yīng)期(first order)。如果反應(yīng)速率受兩種或兩種以上物質(zhì)濃度的影響,則反應(yīng)可為一級、二級或多級反應(yīng)。因產(chǎn)物【P】與時間t不成線性關(guān)系,又稱為非線性反應(yīng)期。此期,酶促反應(yīng)速率不再與酶活力成正比。
要準確測定酶活性,必須了解不同酶反應(yīng)速率和時間的關(guān)系,找出酶促反應(yīng)速率恒定的時間,避開延滯期、非線性反應(yīng)期。傳統(tǒng)的手工分析法無法在零級反應(yīng)期測定,故結(jié)果不夠準確。
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